一款造价仅百元的试剂盒让MMA从“能确诊”到“能早筛”

据最新发布的《中国罕见病定义研究报告2021》，我国对于罕见病的定义是即新生儿发病率小于万分之一、患病率小于万分之一、患病人数小于14万的疾病。在总人口14亿的庞大基数下，这样渺小的数据就犹如大海里的一粒石子，不曾有人留意。因此，无论是医药研发，还是社会保障，罕见病群体似乎都容易被忽略。

而随着社会的进步，越来越多的人开始关注罕见病，山东第一医科大学（山东省医学科学院）赵燕教授就是其中之一。赵教授从事罕见病研究多年，临床经验告诉她，一些罕见病如果能够及早诊断并采取措施，治疗效果更佳，甚至让患者获得正常人的生活状态。

近年来，赵教授一直在从事甲基丙二酸血症（MMA-cblC，后简称：MMA）的研究。MMA是一种常染色体隐性遗传病，患者由于基因缺陷引起代谢异常体内甲基丙二酸等酸性代谢产物堆积，引起脑、肝、肾、骨髓及心脏等多脏器损伤，常被称为“柠檬宝宝”。

赵教授发现，目前市面上的MMA诊断方法还存在价格过高、假阳性率较高、操作复杂等问题，很多三甲以下医院都无法准确诊断出MMA。基于目前市面上存在的痛点，她认为开发一款即经济实惠又准确易操作的MMA检验产品是市场所需。

几年前，赵教授保持长期合作关系的济南市新生儿疾病筛查中心对全市新生儿进行了一次MMA筛查调研，中心通过串联质谱对2011年5月至2021年5月出生的6800例新生儿完成了新生儿基因筛查。结果显示，十年间共３例患儿确诊MMA，以及318例患儿携带甲基丙二酸的致病变异，总携带率为4.68％。

从数据来看，MMA的发病率似乎并不高，但我们仍然不能放弃对MMA疾病的治疗研究。因为MMA除了让患者感到不适以外，还会引发各种后遗症，严重的还会危及生命。MMA患儿在婴幼儿时期通常以喂养困难、呕吐、腹泻和嗜睡等为主要症状，严重的还会诱发脑病、肾病等。有些MMA患者症状会在四岁后表现，常以体重不增和生长发育缓慢，伴有贫血、肌张力减退及癫痫等为主要表现。另外，还有少数患者会出现溶血性尿毒症综合征、弥漫性肺泡出血综合征和肺动脉高压及视网膜病变、黄斑病变等。

由于MMA的临床表现具有迷惑性，很多没能确诊MMA的患儿在治疗过程中往往会出现“头痛医头，脚痛医脚”的情况，无法对症下药。这对家庭造成经济负担、精神压力的同时，患者也无法获得较好的治疗效果。

因此，无论是从卫生经济学的角度，还是从患者及患者家庭生活质量来看，尽早筛查MMA都是具有价值的。

目前MMA筛查主要有三种方式，分别是：尿气相色谱质谱检测、串联质谱法以及Sanger检测基因检测。但这三种方式在临床上都仍存在不足。

尿气相色谱质谱检测需要留尿处理，但这对于自控能力较差的婴幼儿来说颇有难度，并且其他疾病也可能造成尿液中的筛查物质升高，出现误诊。而串联质谱法虽然操作方便，但其初筛阳性率高，无形之中增加了筛查成本。目前Sanger检测基因检测是最准确的一种筛查方式，但由于机器价格昂贵很多家庭难以负担。

而赵教授研发的应用熔解曲线检测MMACHC基因高频突变的试剂盒（后简称：MMACHC检测试剂盒）或许就能解决这些问题。

在赵教授看来，能称之为“成功”的检测手段，首先得保证高准确性。因此，在设计MMACHC检测试剂盒时，赵教授选择从准确性较高的基因检测法入手。

赵教授团队设计的MMACHC检测试剂盒主要是基于高分辨率熔解曲线法（HRM），利用实时 PCR 技术展示双链核苷酸熔解过程中荧光信号值的变化，最后借助专业分析软件对测试群体实现基于不同形状熔解曲线的基因分析或归类，从而准确检测出MMACHC基因，以达到筛查MMA患者的效果。

目前高分辨率熔解曲线法已经被广泛应用于核酸突变扫描、基因分型、甲基化检测、短串联重复序列分析、序列匹配和RNA编辑等方面研究，在国内外核酸分子实验室已经得到成熟的应用与验证。其多款相关应用产品已经问世，这为赵教授团队的MMACHC检测试剂盒设计创造了良好的应用前提。

赵教授告诉动脉橙果局：“用这样的方式进行筛查甚至能够区分出不同的突变类型，其分辨精度可达单个碱基差异。和其他高通量测序法相比假阳性概率更低。”

除了准确性，MMACHC检测试剂盒和其他检测方式相比，还存在操作简单、速度快、性价比高的优势。

在操作过程中，操作者仅需将收集到的样本放进试剂盒，其余步骤不同形状熔解曲线的基因分析、归类等，都将由专门的分析软件自动进行。从目前的试验来看，从样本处理到结果仅需2小时，即节省了人力成本同时也降低了时间损耗。

另外，无论是从耗材成本，还是分析成本，MMACHC检测试剂盒都更加经济实惠。在耗材上，赵教授团队采用的是DNA检测方向的甲基丙二酸血症HRM-PCR试剂盒，其生产线较为成熟，成本不过百元。在分析端，赵教授团队使用的检测方式能够覆盖80%的致病基因突变位点，避免患者因反复检测产生不必要的重复费用。

从卫生经济学的角度来看，疾病的检测成本往往和疾病的防治效果成正比。只有让人人都能做检测、做得起检测，疾病的防治工作才能更进一步。

目前，MMACHC检测试剂盒已经进入临床阶段，目前正在积极寻找寻找试剂合作公司，希望进一步推进项目。同时，赵教授团队还和全国多家知名医院达成试点应用合作，能够获得一手的临床反馈信息，为进一步优化试剂盒提供针对性意见。

为了让罕见病不再“孤独”，在科研之余赵教授还积极推动罕见病宣传、防治工作。

她积极推进和各大医院的合作，利用医院和产妇之间的密切关系增强新生儿家庭对罕见病筛查的重视，并对罕见病的防治进行普及。同时，身处我国MMA发病率及携带率高发地区济南，赵教授还在致力于推进新生儿基因筛查作为新生儿生化筛查的重要补充，并建议本地域育龄夫妇和入园和入校学生进行全面MMA相关致病基因的携带者筛查，争取做到早发现、早治疗。

如果说罕见病就像是一座孤岛，那么像赵教授一样关注罕见病的医生们就是一颗颗闪烁的星，用自己的微光让孤岛能够被更多人看见。随着国家对罕见病药物开发的鼓励，以及医疗保障体系的改革，相信在不久的未来，罕见病患者“诊断难、治疗难、费用高”难题一定能得到解决。