200万元，华科大附属协和医院拟转化CAR-T疗效精准监测技术成果

日前，华中科技大学同济医学院附属协和医院发布科技成果转化公示，医院拟将“通用的CAR拷贝数检测剂及其应用和应用方法、CD19表达的检测方法”两项专利技术以协议定价方式转让予武汉赛拓康生物科技有限公司，拟转让金额200万元。该专利技术发明人为华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科梅恒教授团队。

团队围绕CAR-T治疗中的关键监测难题开展攻关，成功开发出具有高普适性与精度的CAR拷贝数检测技术，并建立CD19表达及可变剪接异构体的动态监测体系，为CAR-T治疗的个体化评估与复发机制解析提供了重要工具，进一步推动了细胞治疗领域的精准监测与疗效优化。

本次专利技术的受让方武汉赛拓康生物科技有限公司，是一家专注于生物技术研发与转化的创新型企业。公司立足生命科学与医疗健康领域，致力于前沿检测技术、诊断试剂及治疗伴随产品的开发与产业化。

该技术包是一套用于CAR-T细胞治疗全程监控的分子检测解决方案。其中一项技术通过特异性引物实现抗CD19 CAR-T治疗后肿瘤细胞CD19表达水平及可变剪接异构体的精准监测，可用于评估治疗效果与复发机制。

另一项技术提供通用、高灵敏的CAR拷贝数检测方法，通过靶向HIV改造慢病毒载体的保守序列，可精准定量不同CAR-T产品中CAR基因的拷贝数。

两者结合，共同完善了从CAR-T细胞体内扩增到肿瘤靶点表达动态的疗效监测体系。

CAR-T细胞疗法，全称嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，是一种革命性的肿瘤免疫治疗方法。它不属于传统的药物或手术，而是一种“活体药物”。

其核心原理是通过基因工程技术，将患者自身的T细胞在体外进行改造。科学家为T细胞装上一种名为“嵌合抗原受体”的“导航头”。这个CAR结构能使T细胞精准识别肿瘤细胞表面的特定靶点（如CD19蛋白）。经过扩增后，这些被“武装”和“强化”的CAR-T细胞回输到患者体内，便能像特种部队一样，定向追踪并高效清除肿瘤细胞。

B细胞恶性肿瘤是一大类起源于B淋巴细胞（一种负责产生抗体的免疫细胞）或其前体细胞的癌症。这类疾病的共同特征是B细胞在发育、分化的某个阶段失去控制，发生恶性增殖和积累。它主要包括以下几种常见类型：

1.急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）：起源于骨髓中未成熟的B前体细胞，常见于儿童和成人，病情进展迅速。

2.非霍奇金淋巴瘤（如弥漫大B细胞淋巴瘤等）：起源于淋巴结或淋巴组织中相对成熟的B细胞，是发病率最高的淋巴瘤类型。

3.多发性骨髓瘤：起源于骨髓中的浆细胞（B细胞发育的终末阶段），主要影响骨骼和造血系统。

CAR-T疗法与B细胞恶性肿瘤的关联之所以至关重要，是因为超过95%的B细胞恶性肿瘤表面都特异性高表达CD19分子。这使得CD19成为一个近乎完美的理想靶点。

因此，全球最早获批、应用最成熟的CAR-T疗法都是靶向CD19的CAR-T产品，它们已在治疗复发/难治性B-ALL和某些类型淋巴瘤中展现出变革性的疗效，改变了这类疾病的治疗格局。

该专利技术包所解决的对CAR-T细胞数量（拷贝数）和肿瘤靶点CD19表达质量的监测问题，正是为了优化和保障这一尖端疗法在B细胞恶性肿瘤患者中的应用效果与安全性。

该专利技术包共同对应的核心疾病是B细胞恶性肿瘤，主要包括急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）、淋巴瘤及多发性骨髓瘤等。这些疾病的共同特征是B细胞或其前体细胞发生癌变，并在血液、骨髓或淋巴系统中异常增殖。

目前，针对这类血液肿瘤的革命性临床方案是嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法。该疗法通过基因工程手段，将能识别肿瘤表面特定抗原（如CD19）的CAR结构导入患者自身的T细胞中，从而改造出一支能够精准识别并清除肿瘤的“活体药物”。

以靶向CD19的CAR-T疗法为例，它在复发或难治性B-ALL患者中取得了约70-90%的初始完全缓解率，已成为挽救生命的关键手段。然而，这一卓越疗效的背后仍存在显著临床缺陷。首先，治疗的有效性与安全性高度依赖于回输的CAR-T细胞在患者体内的动态行为，包括其定植、扩增高峰和长期存续情况。

临床研究表明，CAR-T细胞的早期扩增曲线与治疗反应和细胞因子释放综合征等副作用相关，而其长期存续则与缓解持续时间相关。因此，对体内CAR-T细胞进行精确定量监测，是优化患者临床管理、预判疗效与安全风险的核心需求。

但现有的监测手段存在根本性缺陷。目前临床和实验室最常使用荧光定量PCR技术来检测CAR拷贝数，以此间接反映CAR-T细胞的数量。该技术需要通过一系列已知浓度的标准品建立标准曲线，再根据待测样本的扩增循环阈值（Ct值）进行推算。

然而，由于不同公司、不同产品的CAR结构存在差异，特别是其单链抗体（scFv）和信号域（如4-1BB-CD3ζ）的序列各不相同，导致针对某一特定CAR设计的引物和探针无法通用。例如，已上市的瑞基奥仑赛就缺乏公开有效的检测工具。

此外，对标准品的依赖和实验操作的重复杂性，使得该技术难以在临床广泛、标准化地开展，且定量结果的准确性与重复性易受影响。

另一方面，即使CAR-T细胞在体内成功扩增，仍有高达30-60%的患者面临治疗后复发的困境，其中“抗原阴性逃逸”是主要难题，这意味着肿瘤细胞通过下调或完全丢失CD19抗原，从而躲避CAR-T细胞的识别与攻击。

目前研究揭示，最重要的逃逸机制之一是CD19基因的mRNA发生了可变剪接。可变剪接是细胞在生成成熟mRNA时，对RNA前体进行不同方式的剪接，从而产生多种异构体的过程。在治疗压力筛选下，肿瘤细胞可能优先表达那些被错误剪接的CD19 mRNA。

这些异常的mRNA翻译出的蛋白质异构体，往往缺失了胞外区、跨膜区或恰好被CAR-T细胞识别的关键抗原表位，导致CD19蛋白无法定位到细胞膜上，或即使表达也无法被CAR-T细胞结合。

要深入验证这一关键复发机制并指导临床决策，就必须能够精准、动态地监测患者肿瘤细胞中正常CD19与各种异常剪接异构体的表达比例。

然而，由于这些异构体序列独特且复杂，建立一套稳定、可靠且适用于临床样本的检测体系非常困难。这一技术瓶颈严重阻碍了科研人员对复发机制的深入探索，也使得临床医生无法提前预判哪些患者可能因抗原逃逸而治疗失败。

综上所述，当前CAR-T细胞治疗B细胞恶性肿瘤的临床实践，同时面临两大监测盲区：

一是无法通用、精准、便捷地量化体内CAR-T细胞动力学。

二是无法有效监测肿瘤靶点CD19的表达完整性，特别是难以甄别由可变剪接导致的抗原阴性逃逸。

这两个缺陷共同限制了对疗效的准确评估、对复发机制的深入理解以及对患者的个体化精准管理。

为此，该专利技术包提出了一套整合性解决方案，旨在攻克上述核心瓶颈。

该专利技术包的核心优势与先进性在于，它提供了一套整合且精准的分子监测体系，从根本上解决了当前CAR-T细胞治疗在疗效评估与复发监测中的两大关键难题。

其先进性并非单一技术的突破，而是通过两项专利技术的有机协同，实现了对治疗全程“细胞药物”动态与“肿瘤靶点”状态的双重、同步精准把控。

首先，在监测CAR-T细胞体内动力学方面，该技术包摒弃了传统依赖特定CAR结构序列的设计思路，开创性地采用了“靶向递送载体”而非“货物”的通用策略。绝大多数临床CAR-T产品都是通过基于HIV病毒改造的慢病毒载体将CAR基因导入T细胞的。这段改造后的病毒基因组（称为前病毒）会将其保守区域稳定地整合到宿主细胞基因组中。

该专利巧妙地针对此前病毒序列中高度保守的5’LTR区域，设计出通用的检测探针和引物对。这意味着，无论CAR结构中的靶向抗体（scFv）或信号域如何变化，只要它是由这类HIV来源的慢病毒载体递送的，就可以被同一套检测工具精准捕获和定量。

这种方法一举克服了现有检测方法因CAR结构多样性导致的“一个产品一套试剂”的局限，实现了对包括瑞基奥仑赛在内的多种CAR-T产品的普适性检测。结合数字化PCR技术，该方法无需标准曲线，直接进行绝对定量，具有更高的灵敏度、特异性和重复性，为临床大规模、标准化监测CAR-T细胞的扩增与存续提供了可靠工具。

其次，在评估肿瘤免疫逃逸风险方面，该技术包首次建立了一套能够精确定量CD19基因关键可变剪接异构体的成熟检测体系。抗原阴性复发，特别是由CD19基因异常剪接导致的逃逸，是CAR-T治疗失败的主要原因。

该专利通过深入分析CD19基因的转录本结构，针对全长转录本以及两种重要的缺失性剪接异构体（Δex2和Δex5-6），精心设计了一套包含5对引物的检测组合。这些引物分别靶向不同剪接异构体特有的外显子连接处或共存区域，如同多把特异性极高的“分子钥匙”，能够从复杂的RNA样本中，精准地区分并定量出各种CD19 mRNA变体的比例。

同时，通过选用表达丰度匹配的内参基因（HPRT1），确保了在CD19表达水平较低的情况下，相对定量结果的准确性。这套方法使得临床医生和研究人员能够动态监测患者治疗前后肿瘤细胞中功能性CD19与缺陷型CD19异构体的比例变化，从而在早期预警抗原修饰逃逸的发生，并为阐明复发机制、指导后续治疗策略提供了至关重要的分子证据。

综上，该专利技术包的先进性体现在其设计的前瞻性与系统性。它不仅仅提供了两个孤立的检测方法，而是构建了一个从“效应细胞”（通过通用CAR拷贝数监测）到“靶点完整性”（通过精准剪接异构体分析）的全方位、闭环监测方案。通过将通用性与特异性相结合，定量与定性相结合。

该技术包显著提升了CAR-T治疗疗效评估的精度和深度，有力推动了肿瘤免疫治疗向真正的个体化、精准化管理迈进。

当前CAR-T细胞治疗市场正面临两大核心痛点：传统自体CAR-T疗法存在制备周期长、成本高昂、产品批次间差异大等产业化瓶颈；而治疗过程中体内CAR-T细胞的动态变化与肿瘤抗原的逃逸风险，则构成了疗效评估与复发监控的临床管理难题。正是为了突破这些限制，国内外生物科技企业正积极布局下一代技术。

吉利德通过2025年收购 Interius，推进其合作开发的INT2104（慢病毒载体，靶向 CD19，用于 B 细胞恶性肿瘤），该管线2024年在澳大利亚完成首例患者给药，是全球首个进入人体临床试验的体内CAR-T，目前处于1期，计划2026年提交生物制品许可申请（BLA）。

艾伯维2025年收购Capstan后，获得其CPTX-2309（LNP递送，靶向CD19，用于B细胞介导的自身免疫性疾病），该管线处于1期，相关研究已发表于《Science》。

Umoja开发的UB-VV111（纳米抗体慢病毒载体，靶向CD19，用于血液瘤）2024年获FDA IND批准进入1期，同时与驯鹿生物合作开发UB-VV400（靶向CD22，用于肝细胞癌），同样处于1期。

科济生物是国内领先的CAR-T公司，已拥有获批上市的BCMA CAR-T产品及备受关注的实体瘤 Claudin18.2 CAR-T 细胞，在通用 CAR-T 领域早有布局，开发了THANK-uCAR 技术平台及升级版THANK-u Plus平台，后者能克服NK细胞对通用CAR-T细胞疗效的潜在影响，在不同 NKG2A 表达水平 NK 细胞存在下均可持续扩增且扩增水平显著优于前者，动物实验中抗肿瘤疗效也更优，基于 THANK-u Plus 平台开发了通用型BCMA CAR-T、CD19/CD20 CAR-T和CD38 CAR-T，并启动多项IIT研究。

邦耀生物的自免通用CAR-T表现突出，2024年10月4日，Nature官网头条刊登了上海长征医院徐沪济教授团队与华东师范大学刘明耀教授、杜冰教授团队合作开展的异体通用 CAR-T治疗自免疾病的临床研究，该研究使用邦耀生物开发的异体通用型CAR-T细胞 BRL-303成功治疗了3名硬皮症患者。

2025年1月，邦耀生物联合上述科研团队及上海长征医院、浙江大学医学院第二附属医院等临床团队共同开展的新一代异体通用型CAR-T疗法治疗自身免疫疾病的研究，以Research Article形式被期刊Cell选入2014-2024重大里程碑榜单，该研究成果于2024年7月15日在Cell正式发表，是国际上首次报道异体通用型CAR-T细胞成功治疗自身免疫疾病，也是顶尖学术期刊Cell首次发表CAR-T细胞治疗自免疾病的研究。

总而言之，该专利技术包精准切入细胞治疗精准管理的未满足需求，其发展前景与整个CAR-T行业向更高效、更可及、更可控方向的演进紧密相连。后续的产业化开发策略和临床数据积累，将决定其理论优势能否转化为实际的市场与应用地位。