NAR：中国农业大学韩红兵揭示一种用于高效多重基因组编辑的工程化CRISPR–Cas12i工具

中国农业大学韩红兵团队开发了一种高效的多重基因组编辑工具——工程化CRISPR–Cas12i系统。通过优化CRISPR RNA（crRNA）的设计、密码子使用和核酸外切酶融合，研究人员构建了初步优化的Cas12i（IOCas12i）系统，并进一步通过合理设计和氨基酸突变，构建了增强优化的Cas12i（EOCas12i）系统，包括EOCas12i-Combo1和EOCas12i-Combo2。与野生型Cas12i.3相比，这两个变体在编辑效率上分别提高了2.5至22.8倍和3.0至60.0倍，且表现出高特异性和更长的插入和缺失（indel），有助于基因敲除。此外，它们能够使用紧凑型crRNA阵列对多达30个靶标进行高效的多重编辑。这些进展使EOCas12i-Combo1和EOCas12i-Combo2成为多重基因组编辑应用的有前景的平台，对于基础研究和实际应用都至关重要。