何川团队开发了超温和亚硫酸氢盐测序方法UMBS-seq,该技术在5-甲基胞嘧啶(5mC)检测中表现出色,特别是在低输入量DNA样本中。UMBS-seq通过优化亚硫酸氢盐转化条件,减少了DNA损伤和背景噪声,提高了文库产量、复杂性和转化率,优于传统BS-seq和酶法甲基化测序(EM-seq)。这项技术特别适用于细胞游离DNA(cfDNA)的检测和基于杂交的靶向捕获,具有在5mC生物标志物检测和疾病早期诊断中的巨大临床应用潜力。研究团队确定了最佳试剂配方和反应条件,包括100μL 72%亚硫酸氢铵和1μL 20μM KOH,在55°C下反应90分钟,并通过添加碱性变性步骤和DNA保护缓冲液进一步提高效率。