多层级代谢工程改造大肠杆菌，实现视黄醇245.73 mg/L高效合成

江南大学白忠虎团队在《Bioresource Technology》上发表的研究，通过多层级代谢工程策略，在大肠杆菌中实现了视黄醇的高效合成。研究首先建立了β-胡萝卜素合成途径，通过导入β-胡萝卜素合成基因（如crtY、crtB、crtE）和异戊烯（MVA）通路基因，提高了β-胡萝卜素的产量。其次，通过优化RBS序列，显著提升了crtE基因的表达效率，使β-胡萝卜素产量达到45.38 mg/L。此外，研究还利用定向进化技术对CrtY酶进行突变，筛选出的突变体YCO-6将β-胡萝卜素产量提高至163.76 mg/L。最后，引入海洋细菌Bacteroides sp. 66A03的Blh基因，并采用双相发酵系统，最终在4-L生物反应器中实现视黄醇产量达245.73 mg/L，为工业化生产奠定了基础。