自身免疫病检测新突破，ELISPOT竟能揪出隐藏的记忆 B细胞

2025年12月1日获悉，本文将通俗解读酶联免疫斑点试验（ELISPOT）技术的原理、在自身免疫病中的应用、优缺点及发展前景，带领了解这一检测技术的奥秘。B细胞ELISPOT主要有三种操作形式，区别在于抗原的包被方式：直接包被：把抗原直接吸附在PVDF膜上，操作简单直接；亲和包被：给重组抗原加上组氨酸标签，通过抗组氨酸抗体将抗原固定在膜上，能更好保留抗原的天然结构；反向ELISPOT：先用泛Ig捕获试剂捕捉所有抗体分泌细胞的分泌产物，再用带标记的抗原去检测特异性，适合筛查未知的抗原特异性。ELISA只能检测血清中已经存在的抗体总和，是对“结果”的检测；而ELISPOT不仅能直接检测体外的抗体分泌细胞，还能通过体外刺激，让静止的记忆B细胞分化成抗体分泌细胞后再检测，相当于能找到免疫系统的“潜在反应能力”，灵敏度也更高。如今，ELISPOT还和荧光检测结合形成FluoroSpot技术，能同时检测不同类型的免疫球蛋白，更深入分析免疫反应的特点；反向ELISPOT还能通过抗原滴定，了解自身反应性B细胞的亲和力，为研究疾病进展提供更多细节。