将天然CRISPRi改造为CRISPR转座酶

2025-09-08 微生物遗传与工程生物学 等6家媒体报道 科研进展

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研究人员将天然CRISPRi系统中的TldR（一种RNA引导的转录抑制因子）改造为CRISPR转座酶，替代V-K型CAST中的Cas12k。通过将TldR与TniQ融合，并将Cas12k识别的PAM序列替换为TldR识别的TAM序列，新系统能够高效介导RNA引导的DNA整合，保持插入方向控制和目标位点免疫性，同时降低非目标位点的插入。此外，作者还将TnsB与归巢内切酶融合，实现“剪切-粘贴”式转座。实验发现TldR与不同TniQ同源物的兼容性并不完全依赖于序列相似性或进化亲缘关系。这项研究为基因组工程提供了新的工具和方法，相关成果已在bioRxiv上发表。（摘要由动脉网AI生成）