Split sgRNA设计，无需逆转录或扩增即可直接检测

2025-09-16 小桔灯网 等1家媒体报道 科研进展

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本文介绍了一种基于CRISPR-Cas12b系统的分裂sgRNA设计策略，该策略通过将sgRNA拆分为通用组件（如tracrDR或tracrRNA+DR）和可替换的Spacer区域，实现了对Cas12b活性的动态调控，并扩展了其检测功能。Cas12b系统在分子诊断领域展现出巨大潜力，具有较小的体积、较宽的温度和pH耐受性以及在人血浆中的稳定性。然而，Cas12b需要较长的sgRNA（约111 nt），限制了其应用。分裂sgRNA设计不仅解决了这一问题，还使Cas12b能够直接检测microRNA等小分子核酸。实验结果显示，分裂结构保留了Cas12b的顺式和反式切割活性，尽管结合亲和力有所下降，但反式切割效率与全长sgRNA相当。这项研究为基因编辑和突变检测提供了新的工具，并有望推动Cas12b在分子诊断领域的广泛应用。（摘要由动脉网AI生成）