山大刘巍峰等实现里氏木霉转化偶联重组

2025-03-10 微生物遗传与工程生物学 等1家媒体报道 科研进展





打开微信“扫一扫”
点击右上角分享按钮

山东大学刘巍峰团队在《ACS Synthetic Biology》上发表了一项研究，开发了里氏木霉中同时进行体内组装和靶向基因组整合多个DNA片段的方法（SATIMD）。通过敲除非同源末端连接关键基因ku70并利用Cas9反筛，该方法实现了高效的多片段组装与整合。实验发现，使用500 bp同源臂时整合效率最高，而片段重叠序列长度对组装效率影响不大。此外，未敲除ku70的菌株仍能有效整合6个片段，简化了遗传操作。研究还展示了SATIMD在整合9.8 kb Xyr表达盒和32.7 kb山梨醇菌素合成基因簇中的应用，分别达到77%和70%的拼接效率，以及85%和20%的整合效率。这一方法为里氏木霉的大片段外源DNA转化提供了新的途径。（摘要由动脉网AI生成）