山大祁庆生等开发基于碱基脱氨酶-解旋酶和引发酶-易错DNA聚合酶的体内靶向诱变系统

2025-05-19 微生物遗传与工程生物学 等3家媒体报道 科研进展

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山东大学祁庆生团队开发了一种基于碱基脱氨酶-解旋酶和引发酶-易错DNA聚合酶的体内靶向诱变系统（ITMU），该系统利用广泛宿主范围质粒RSF1010，通过将腺嘌呤脱氨酶TadA8e与解旋酶RepA融合，以及易错DNA聚合酶PolI4MT与引物酶RepB融合，实现了在多种微生物底盘中的高效突变。ITMU能够在含有RSF1010复制子的质粒中诱导所有类型的突变，突变率比宿主基因组高1.18 × 10^5倍，并且在大肠杆菌、恶臭假单胞菌、谷氨酸棒杆菌和解脂耶氏酵母中均有效。这一系统为蛋白质进化提供了新的工具，适用于多种非传统宿主物种，为体内连续进化系统提供了可行的替代方案。（摘要由动脉网AI生成）