20万元！中山大学拟转让一种药材DNA分子鉴别方法

近日，中山大学发布科技成果转化公示，学校通过成果转让方式，拟将“一种脑心通制剂中地龙药材的DNA分子鉴别方法”相关专利转让给陕西步长制药有限公司使用，交易总额为人民币20万元。该专利技术发明人为苏薇薇教授及其团队。

本发明是一种针对脑心通制剂中地龙药材的DNA分子鉴别方法，核心目的是精准鉴定脑心通制剂（如脑心通胶囊）中是否含有地龙正品，以及明确地龙的具体物种，解决中药制剂中地龙药材鉴定难、质量控制缺失的问题。

脑心通制剂作为临床治疗心脑血管疾病的常用中药，地龙作为其核心臣药，其正品属性直接影响药效发挥与用药安全。

据2015年版《中国药典》规定，地龙正品来源为参环毛蚓、通俗环毛蚓等4种特定环毛蚓的干燥体，但我国蚯蚓品种繁多、形态相似，市场上地龙药材掺假、品种混杂现象普遍，大腔蚓、暗孔远盲蚓等伪品屡见不鲜，给药材质量把控带来巨大挑战。

地龙药材的传统鉴别依赖基原、性状、显微及薄层鉴别等方式，不仅专属性和特异性较弱，还对鉴定者的专业经验提出极高要求，普通从业者难以精准区分正品与伪品。

更关键的是，脑心通制剂经晒干、粉碎等加工后，地龙的形态特征完全消失，传统方法失去鉴别依据，无法满足制剂生产与监管中的实际需求。

目前，2015年版《中国药典》未对脑心通制剂中地龙的质量控制作出规定，行业内也缺乏针对性的有效鉴别手段，导致制剂中地龙的正品保障缺乏科学支撑。

在分子鉴别技术应用中，现有研究多采用通用引物对COⅠ等基因进行PCR扩增，但脑心通制剂中的地龙DNA在加工、保存过程中易降解为小片段，难以被常规通用引物扩增。

同时，制剂中含有的水蛭、全蝎等其他动物药，其基因片段可能与地龙相似，易造成鉴别干扰，进一步加剧了正品鉴定的难度。这些问题导致脑心通制剂地龙成分的质量控制长期处于空白状态，既不利于制药企业的生产质控，也给药品监管带来阻碍，亟需专用、高效的鉴别技术破解行业困境。

针对脑心通制剂中地龙形态特征消失、DNA降解、传统鉴别方法专属性弱等行业痛点，中山大学研发的“脑心通制剂中地龙药材的DNA分子鉴别方法”，以“特异性引物设计+多步骤协同验证”为核心，构建了“高效扩增+精准判定”的一体化鉴别方案，从技术原理到实际应用实现全方位创新，填补了脑心通制剂地龙质量控制的空白。

该技术的核心优势在于靶向设计的特异性引物，破解了传统分子鉴别难以适配制剂特性的难题。传统通用引物仅能扩增350-700bp的基因片段，无法应对脑心通制剂中地龙DNA降解后的小片段检测需求，且易受水蛭、全蝎等其他动物药干扰。本发明针对性设计3对地龙专属引物，分别靶向Metaphire属（通俗环毛蚓、威廉环毛蚓）和Amynthas属（参环毛蚓、栉盲环毛蚓），可精准扩增200-350bp的小片段基因，彻底规避DNA降解影响。其中COI MetaphireF2/R2引物对专属性极强，仅扩增Metaphire属正品地龙基因，不与Amynthas属地龙及伪品发生反应；COI AAF2/R1、COI AAF3/R1引物对则精准匹配Amynthas属正品，通过测序可进一步区分正品与伪品，有效排除制剂中其他动物药的干扰。

在鉴别流程上，技术通过多步骤协同验证，实现正品判定的精准高效。DNA提取阶段采用蛋白酶K消化动物药组分，搭配广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒，同时保留地龙与植物药的DNA信息，避免组分干扰；PCR扩增环节优化反应体系与程序，15μL的精简体系搭配特定退火温度（55℃或58℃），确保扩增效率与特异性；电泳检测与测序双重验证，既通过单一明亮条带初步筛选阳性样本，又借助Gen Bank数据库BLAST比对实现物种精准溯源，正品需同时满足“条带匹配”与“物种一致”两大条件，判定准确率大幅提升。

此外，技术兼顾便捷性与通用性，适配不同场景的质控需求。针对陕西步长制药等企业常用的Metaphire属地龙投料，可仅通过COI MetaphireF2/R2引物扩增后的电泳结果直接判定，省略测序步骤，检测效率显著提升；3对地龙特异性引物全面覆盖《中国药典》规定的4种地龙正品，可适配脑心通胶囊及各类含地龙细粉的中药制剂，不受药材加工形态限制。同时，技术操作流程标准化，从DNA提取到结果判定的步骤清晰可控，无需依赖操作人员的专业经验，为制药企业生产质控、药品监管部门监督检验提供了科学可靠的技术支撑，助力中药制剂质量控制体系升级。

随着中药制剂质量监管趋严及分子鉴别技术的普及，地龙药材及含地龙中药制剂的精准鉴定需求日益增长。目前市场上围绕地龙鉴别的技术研发主要聚焦“传统方法优化”与“分子技术创新”两大方向，国内外企业、科研机构通过引物设计、检测流程简化、多技术融合等方式突破行业痛点，形成多元化竞争格局。

深圳华大智造科技股份有限公司推出中草药DNA条形码高通量基因测序一体机（HMBI-G30），面向中药材大规模物种鉴定与溯源。设备支持SE50/SE100等多读长测序可兼容降解DNA样本，通过片段化测序与拼接解决中药制剂DNA碎片化难题，配套百万级序列数据库完成物种比对。该仪器为全球首款中草药专用高通量鉴定设备，广泛应用于药检机构、大型药企与科研院所，可支撑地龙等多物种同步检测，但暂未针对脑心通等复方制剂做专属引物与流程优化。

博奥生物集团有限公司联合中国中医科学院中药资源中心推出中药材PCR快速鉴定试剂盒系列，聚焦动物药专属性检测，已落地蛇类等品种的商业化应用。核心优势为快速DNA提取+荧光PCR扩增一体化流程，可在2小时内完成从样本处理到结果判读，适配药检所、生产企业QC实验室等场景。其中蛇类PCR快检试剂盒已纳入广东省药品检验平台，实现中药材分子鉴定现场化、标准化，为地龙等动物药试剂盒开发提供成熟范式。目前该系列覆盖多种易混淆动物药，具备完善的试剂配方与质控体系，是中药分子鉴定国产化标杆产品。

河北省中药材质量检验检测研究中心有限公司构建DNA序列+二维码数字化溯源体系，将药材鉴定结果转化为便携二维码标签，贴附于饮片与制剂包装，支持手机端快速核验物种信息。该技术打通“鉴定-赋码-流通-监管”全链条，可实现地龙等药材从原料到成品的全程追溯，降低市场掺假与混淆风险。目前已在河北安国等核心中药材集散地规模化应用。